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細(xì)胞計(jì)數(shù)用臺(tái)盼藍(lán)染料or AOPI熒光染料?

更新時(shí)間:2023-06-13瀏覽:1747次

細(xì)胞計(jì)數(shù)是細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的重要步驟,為了解細(xì)胞的濃度、數(shù)量和活率等信息,實(shí)驗(yàn)人員常用臺(tái)盼藍(lán)染料或AOPI熒光染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色-計(jì)數(shù)。


1、臺(tái)盼藍(lán)染色法

臺(tái)盼藍(lán)染色是細(xì)胞計(jì)數(shù)中常用的活/死細(xì)胞鑒定染色方法之一。


原理:正常的活細(xì)胞,胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠排斥臺(tái)盼藍(lán),細(xì)胞不被染色;而死細(xì)胞的胞膜不完整,通透性增加,死細(xì)胞會(huì)被染成藍(lán)色,利用臺(tái)盼藍(lán)染料的特性便可區(qū)分活/死細(xì)胞。

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缺點(diǎn)

1-臺(tái)盼藍(lán)對(duì)細(xì)胞有毒害作用,會(huì)致死有損傷的細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞活性檢測(cè)結(jié)果有所偏差;

2-細(xì)胞碎片多、雜質(zhì)多等情況下,無(wú)法進(jìn)行準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。

 

適用細(xì)胞種類(lèi):培養(yǎng)系細(xì)胞。


2、AOPI染色法

當(dāng)細(xì)胞樣品中的雜質(zhì)過(guò)多,明場(chǎng)下無(wú)法進(jìn)行準(zhǔn)確計(jì)數(shù)時(shí),我們可以在熒光通道下,用AOPI熒光染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色。

 

原理:AOPI熒光染料因其只與DNA和RNA結(jié)合的特性——既活細(xì)胞呈現(xiàn)綠色,死細(xì)胞呈現(xiàn)紅色,利用AOPI染色法,可排除雜質(zhì)對(duì)目標(biāo)細(xì)胞的干擾,快速區(qū)分活/死細(xì)胞。

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優(yōu)點(diǎn):排除紅細(xì)胞、血小板、細(xì)胞碎片等雜質(zhì)對(duì)目標(biāo)細(xì)胞的干擾。


缺點(diǎn):與臺(tái)盼藍(lán)試劑相比,成本較高。


適用細(xì)胞種類(lèi):免疫細(xì)胞、原代細(xì)胞、血液細(xì)胞等。

 

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